本文是重庆医科大学细胞生物学及遗传学教研室高江原、重庆市急救中心泌尿外科陈俊霞等共同发表在《中国生物制品学杂志》上的文章。目的是观察人参皂苷Rg3诱导膀胱移行细胞癌细胞系BIU-87的凋亡作用。研究表明,Rg3可通过诱导BIU-87细胞凋亡而发挥其抑制细胞增殖的作用。
1.材料与方法
细胞培养
将BIU-87细胞贴壁培养于含10%胎牛血清、100μg/ml青霉素、100U/ml链霉素的DMEM培养液中,置37℃,5%CO2饱和湿度培养箱中培养。
检测指标
用不同浓度的Rg3(37.5、75、150、300和600μg/ml)处理BIU-87细胞,MTT法检测细胞的增殖活力;荧光染色观察凋亡细胞的形态学变化;流式细胞仪分析细胞周期及细胞凋亡;免疫细胞化学染色观察细胞Caspase-3蛋白的表达;
统计学分析
应用SPSS11.5统计软件进行分析,所有数据用x平均±s表示,两组间比较采用t检验,以P<0.05为差异有统计学意义。
2.结果
Rg3对BIU-87细胞增殖活性的影响
检测结果表明,Rg3浓度在37.5~600μg/ml之间时,细胞增殖受到抑制,且呈浓度依赖性(P<0.01),见表1。Rg3处理细胞48h的IC50值为4μg/ml。

Rg3对BIU-87细胞细胞周期和凋亡的影响
流式细胞仪检测表明,Rg3能诱导细胞凋亡并调节细胞周期。经150μg/ml Rg3作用48h后,BIU-87细胞S期和G2/M期比例上升,G0/G1期比例下降;细胞凋亡率也明显升高(P<0.01)。见表2。

Rg3对BIU-87细胞Caspase-3蛋白表达的影响
检测结果表明,经150μg/mlRg3作用48h后,BIU-87细胞与对照组细胞相比,显现更强的棕色信号和更高的DAB灰度,见图3。表明Rg3诱导了BIU-87细胞的凋亡。

3.结论
本文通过细胞免疫化学实验证实,Caspase-3在经Rg3处理的BIU-87细胞有较强表达,而对照组细胞则呈较弱或阴性表达,表明Rg3能显著抑制BIU-87细胞增殖,调节细胞周期和诱导细胞凋亡。本研究为Rg3应用于临床的肿瘤治疗,包括膀胱癌的化疗提供了实验依据,需进一步的实验来确定Rg3的生物学功能及其抗癌的分子机制。
文献来源:中国生物制品学杂志2010年12月第23卷第12期。
