方法:
体外培养小鼠大肠癌细胞(CT26细胞),采用四甲基偶氮唑蓝比色法分析人参皂苷Rg3对CT26细胞生长的影响。皮下接种建立BALB/c 小鼠大肠癌模型。待肿瘤可扪及(直径约3 mm)时,将荷瘤鼠随机分为生理盐水组及人参皂苷Rg3浓度5、10、20 mg/kg组。每周3次测量小鼠肿瘤长、宽及小鼠体质量,绘制肿瘤体积增长曲线和体质量变化曲线;记录小鼠生存时间,绘制生存曲线。观测小鼠精神状况、饮食以及药物毒副作用等情况。另取20只荷瘤鼠随机分为4组(分组及处理同上),给药第10天处死小鼠,取肿瘤组织行苏木精-伊红(HE)染色观察肿瘤组织坏死情况并测定肿瘤坏死率。
观察指标:
肿瘤坏死率的计算:用固定规格的网状方格(平行线间距为5 mm)随机叠加于肿瘤断面图像上,分别计数位于坏死区及整个肿瘤断面的交点数(2条相互垂直的平行线交点),取其平均值。由此获得的肿瘤坏死区与整个肿瘤断面的交点数之比即为肿瘤坏死率。
统计学方法:
使用SPSS 13.0统计软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差表示,计数资料以百分比表示。肿瘤细胞生长抑制率的比较采用单因素方差分析, 两两比较采用SNK-q法;采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,生存分析采用对数秩检验;各组间小鼠生存质量的比较采用χ2检验。检验水准α=0.05。
结果:
1)人参皂苷Rg3对肿瘤细胞生长抑制率的影响
随着人参皂苷Rg3浓度的逐渐增高,肿瘤细胞的生长抑制率也逐渐增高,不同浓度人参皂苷Rg3(5、10、15、20 μg/mL)作用24 h的细胞生长抑制率分别为(20.30±2.48)%、 (35.18±4.26)%、 (37.55±2.74)%、(41.39±4.14)%,作用48 h的细胞生长抑制率分别为(3.04±0.08)%、(19.12±0.04)%、(33.21±0.03)%、(38.55±0.08)%,见表1。Rg3 作用24 h 的细胞生长抑制较48 h的细胞生长抑制更明显(图 1、2)。
图 1-2
2)人参皂苷Rg3在抑制肿瘤生长中的作用
随着人参皂苷Rg3浓度的提高,荷瘤小鼠肿瘤体积逐渐减低,每组间肿瘤体积从治疗开始后13 d左右逐渐出现差别,第25天小鼠肿瘤体积差别达到最大。见图3。
图3
本研究结果显示,人参皂苷Rg3是一个有效的抗肿瘤药物,体外实验显示其对肿瘤细胞的生长抑制率最高为41.39%,在动物实验发现,其最高肿瘤抑制率为45.75%,肿瘤抑制率是随着人参皂苷Rg3浓度的提高而逐渐升高的。当然,该药的最高抗肿瘤剂量和最高耐受剂量仍需要进一步探索研究。此外,由于我们的研究并未将人参皂苷Rg3和传统抗肿瘤药物如氟尿嘧啶、铂类药物的抗肿瘤效果进行比较,因此,还需要更多的研究进一步观察人参皂苷Rg3的抗肿瘤效果是否不低于其他化疗药物。
本文文献来源:聂世鸿,臧健,曹丹等.人参皂苷Rg3对小鼠大肠癌细胞的抗肿瘤活性研究[J].华西医学,2015,30(3).