血管生成抑制剂Rg3对胃癌生长和转移抑制作用的实验研究

胃癌原位种植模型制备

人胃腺癌细胞株SGC-7901，2×10⁶裸鼠皮下注射，成瘤后反复传代成实体瘤。移植时处死荷瘤鼠，无菌条件下取出肿瘤并浸入生理盐水中，剪碎成3mm大小碎块。实验动物以戊巴比妥钠40mg/kg腹腔注射麻醉，术野皮肤消毒后腹中线切口进腹，于胃大弯侧切开浆膜，植入3mm大小约150mg重肿瘤组织并缝合固定。

治疗试验

术后第7天开始灌胃给药，Rg3剂量为2.5、5.0、10.0mg/kg，对照组为相同容积的生理盐水，每日1次，共6周。种植后第8周末处死动物，检查转移情况，原位肿瘤切除并称重，标本以10%甲醛固定作组织病理检查。

肿瘤内微血管密度测定

采用抗CD31抗体的标记链霉亲和素-生物素(LSAB)免疫组化方法，20×10倍视野下，计数5个最高血管密度区的微血管数并求其均数。

统计学分析

实验数据采用t检验或X²检验分析。

Rg3对肿瘤生长抑制作用

所有种植于胃壁的肿瘤均有生长，肿块表面有结节状突起。Rg3组4只鼠原位肿瘤仅黄豆大小，治疗组与对照组肿瘤重量差异有显著性意义(t检验，2.5、5.0、10.0mg/kg组t值分别为5.56、6.96、8.04，P均<0.0001)，且肿瘤生长的抑制程度与Rg3剂量有关，2.5、5.0、10.0mg/kg Rg3组的抑瘤率分别为52.3%、63.3%和71.6%(表1)。

Rg3对转移的抑制作用

完整组织块SCID鼠胃壁原位种植的胃癌转移模型与临床胃癌患者转移情况很相似，区域性淋巴结转移率达100%，腹膜转移率达78.6%，肝转移率为64.3%，此外还有肾、脾、纵隔淋巴结和肺转移及腹水形成。Rg3对胃癌转移有明显的抑制作用，2.5、5.0、10.0mg/kg剂量组的肝转移抑制率分别为37.8%、68.9%和84.4%，腹膜转移抑制率分别为36.4%、74.6%和74.6%(表1)。

Rg3对肿瘤血管生成的影响

治疗组肿瘤内微血管密度明显低于对照组(t检验，2.5、5.0、10.0mg/kg组t值分别是3.73、5.08、6.43，P值分别<0.001、0.0001、0.0001)，且抑制血管生成作用与Rg3剂量有关，10.0mg/kg剂量抑制作用最明显，但与2.5、5.0 mg/kg时差异无显著意义。

Rg3对肿瘤生长及转移的抑制作用与其抑制血管生成有关。本研究结果显示，Rg3治疗组与对照组肿瘤内的微血管密度差异有显著性意义。最近有报道认为，Rg3能抑制血管内皮细胞增殖活性，因而我们推测Rg3也可能是通过抑制血管内皮细胞增殖而抑制胃癌的肿瘤血管生成的。