研究方法:
应用MTT法、穿膜实验、细胞膜流动性实验、Western blot等检测方法,检测不同浓度Rg3原液对Lovo/5-Fu逆转耐药的机制、细胞膜流动性的影响、细胞侵袭和转移能力及对转移和耐药相关蛋白 nm23、caspase-8、LRP表达的影响。
观察指标:
Rg3对 Lovo/5-Fu细胞的半数抑制浓度;逆转耐药的检测;细胞膜流动性检测;细胞侵袭能力检测;检测蛋白表达。
统计学方法:
统计学方法:采用SPSS 11.5 统计软件处理,数据均以x±s表示,采用t检验方法,P<0.05有显著性差异。
结果:
1)Rg3对Lovo/5-Fu细胞逆转耐药的作用
应用MTT法检测Rg3的IC50值,结果显示:Rg3对Lovo/5-Fu细胞的IC50值为53.01μg/mL,Lovo/5-Fu细胞的耐药指数在5-Fu组为6.5,而在Rg3+5-Fu组为1.89,耐药指数明显降低。见表1。
2)Rg3 Lovo/5-Fu细胞膜流动性的影响
Lovo/5-Fu细胞膜的流动度试验中,30组Lovo/5-Fu细胞中随Rg3浓度的增加,细胞膜的流动度逐渐降低,结果显示:随着Rg3浓度的升高Lovo/5-Fu细胞活动度减低。见图 1。
3)Rg3对Lovo/5-Fu细胞侵袭能力的影响
Rg3作用后,Lovo/5-Fu细胞侵袭能力明显降低,中、高浓度Rg3组比较对照组穿膜的细胞数明显减少(P<0.05),见表3。
结论:
本实验结果提示高浓度的人参皂苷Rg3对人大肠癌高侵袭细胞系 Lovo/5-Fu抑制转移及逆转耐药作用的生理机制可能是通过上调caspase-8信号通路诱导Lovo/5-Fu细胞发生凋亡或通过上调大肠癌抑癌基因nm23的表达来实现。本研究目的是在未来的大肠癌化疗过程中通过联合应用Rg3来降低大肠肿瘤的耐药的发生或逆转已有耐药,从而,应用Rg3来显著延长患者的延缓或预防耐药的发生,明显延长患者的生存期,给与大肠癌患者真正的“新生”。
本文文献来源:杨茂鹏,王艳,王晓红等.人参皂苷Rg3对大肠癌细胞系 Lovo/5-Fu侵袭性及耐药影响的相关研究[J].哈尔滨医科大学学报,2018,52(1).